DETEKSI CMV DAN PYMoV PADA BENIH LADA (Piper nigrum) DENGAN TEKNIK ELISA

Maya Mariana, NFN Miftakhurohmah

Abstract


Salah satu kendala penting pada budidaya tanaman lada yaitu penyakit kerdil yang disebabkan oleh Piper yellow mottle virus (PYMoV) dan Cucumber mosaic virus (CMV). Tindakan pencegahan penyebaran penyakit dapat dilakukan salah satunya dengan penggunaan benih sehat bebas dari infeksi PYMoV dan CMV. Tujuan penelitian adalah mendeteksi keberadaan PYMoV dan CMV pada benih lada siap tanam secara serologi menggunakan teknik ELISA. Benih lada yang dideteksi berumur 5 bulan, berasal dari penangkar benih di Sukabumi (Jawa Barat) dan Purbalingga (Jawa Tengah). Varietas lada yang diambil di Sukabumi adalah Natar 1, Petaling, dan Lampung Daun Kecil., masing-masing sebanyak 10 sampel, sedangkan di Purbalingga hanya ada Natar 1, diambil 30 sampel. Di setiap lokasi pembibitan juga dilakukan pengamatan terhadap gejala infeksi virus yang ditemukan. Deteksi virus dilakukan secara Double Antibody Sandwich (DAS)-ELISA menggunakan antiserum Banana streak virus (BSV) untuk PYMoV dan antiserum CMV untuk deteksi CMV. Hasil ELISA dibaca nilai absorbannya dengan elisa reader pada panjang gelombang 405 nm. Sampel dinilai positif, jika nilai absorbansinya 1,5 kali lebih besar daripada kontrol negatif. Gejala infeksi virus pada benih bervariasi, yaitu klorotik, belang, dan belang disertai perubahan bentuk daun. Hasil pengujian ELISA menunjukkan bahwa 66% benih lada dari Sukabumi dan 46% dari Purbalingga terinfeksi virus CMV. Namun, tidak ada satu pun yang menunjukkan reaksi positif terhadap antiserum PYMoV. Hal ini diduga karena konsentrasi PYMoV terlalu rendah sehingga tidak terdeteksi secara ELISA. Untuk mencegah penyebaran virus, deteksi virus pada benih lada penting dilakukan sebelum digunakan sebagai bahan tanaman. 


Keywords


Piper nigrum; ELISA; virus

Full Text:

PDF

References


Balfas, R. (2009) Status Penelitian Serangga Vektor Penyakit Kerdil pada Tanaman Lada. Perspektif. 8 (1), 42–51.

Balfas, R., Lakani, I., Samsudin & Sukamto (2007) Penularan Penyakit Kerdil dengan Tiga Jenis Serangga Vektor. Jurnal Littri. 13 (4), 136–141.

Balfas, R., Supriadi, Mardiningsih, T.L. & Sugandi, E. (2002) Penyebab dan Serangga Vektor Penyakit Keriting pada Tanaman Lada. Jurnal Littri. 8 (1), 7–11.

Bausher, M.G. (2013) Serial Transmission of Plant Viruses by Cutting Implements during Grafting. HortScience. 48 (1), 37–39.

Bhadramurthy, V., Bhatl, A.I., George, J., Thankamani, C.K. & Mathew, P.A. (2008) Variation in The Concentration and Indexing Black Pepper Plants for PYMoV and CMV through DAS-ELISA. Journal of Spices and Aromatic Crops. 17 (2), 197–201.

Bhadramurthy, V., Retheesh, S.T., Bhat, A.I., Madhubala, R., Hareesh, P.S. & Pant, R.P. (2005) Development of ELISA-Based Technique for The Detection of A Putative Badnavirus Infecting Black Pepper (Piper nigrum L.). Indian Phytopathology. 58 (3), 314–318.

Bhat, A.I. (2012) Characterization and Management of Piper Yellow Mosaic Virus.In: Rao,G. et al. (eds.) Recent Trensd in Plant Virology. Studium Press LLC, pp.105–116.

Bhat, A.I., Devasahayam, S., Sarma, Y.R. & Pant, R.P. (2003) Association of A Badnavirus in Black Pepper (Piper nigrum L.) Transmitted by Mealybug (Ferrisia virgata) in India. Current science. 84 (12), 1547–1550.

Bhat, A.I., Hohn, T. & Selvarajan, R. (2016) Badnaviruses: The Current Global Scenario. Viruses. 8 (6). doi:10.3390/v8060177.

Bhat, A.I. & Siljo, A. (2014) Detection of Viruses Infecting Black Pepper by SYBR Green-Based Realtime PCR Assay. Journal of Plant Pathology. 96 (1), 105–109. doi:10.4454/JPP.V96I1.036.

Bhat, A.I., Siljo, A. & Deeshma, K.P. (2013) Rapid Detection of Piper Yellow Mottle Virus and Cucumber Mosaic Virus Infecting Black Pepper (Piper nigrum) by Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP). Journal of Virological Methods. 193 (1), 190–196. doi:10.1016/j.jviromet.2013.06.012.

Bhat, A.I., Siljo, A. & Devasahayam, S. (2012) Occurrence of Symptomless Source of Piper Yellow Mottle Virus in Black Pepper (Piper nigrum L.) Varieties and A Wild Piper species. Archives of Phytopathology and Plant Protection. 45 (9), 37–41. doi:10.1080/03235408.2011.591121.

Boonham, N., Kreuze, J., Winter, S., van der Vlugt, R., Bergervoet, J., Tomlinson, J. & Mumford, R. (2014) Methods in Virus Diagnostics: From ELISA to Next Generation Sequencing. Virus Research. 186, 20–31. doi:10.1016/j.virusres.2013.12.007.

Clark, M.F. & Adams, A.N. (1977) Characteristics of the Microplate Method of Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for the Detection of Plant Viruses. Journal of General Virology. 34 (3), 475–483. doi:10.1099/0022-1317-34-3-475.

Deeshma, K.P. & Bhat, A.I. (2014) Further Evidence of True Seed Transmission of Piper Yellow Mottle Virus in Black Pepper (Piper nigrum L.). Journal Plant Crops. 42, 289–293.

Dijkstra, J. & de Jager, C. (1998) Enzyme-Linked Immunosorbent Assay.In: Dijkstra,J. & de Jager,C. (eds.) Practical Plant Virology: Protocols and Exercises. Heidelberg: Springer, pp.348–362.

Firdausil, A. (1992) Stunted Disease of Black Pepper. In: Proceedings of International Workshop on Black Pepper Diseases. pp.220–225.

Lakani, I. (2006) Deteksi dan Identifikasi Penyebab Penyakit Belang (Mottle) pada Tanaman Lada (Piper Nigrum L.) di Indonesia. Institut Pertanian Bogor.

Miftakhurohmah & Balfas, R. (2014) Karakteristik Biologi dan Molekuler serta Pengendalian Virus Penyebab Penyakit Kerdil pada Lada. Perspektif. 13 (1), Perspektif, 53–62.

Miftakhurohmah, Mariana, M. & Wahyuno, D. (2016) Deteksi Piper Yellow Mottle Virus (PYMoV) Penyebab Penyakit Kerdil pada Tanaman Lada secara Polymerase Chain Reaction ( PCR ). Bul. Littro 27 (1), 77–84.

Rwegasira, G. & Chrissie, M. (2015) Efficiency of Non-Vector Methods of Cassava Brown Streak Virus Transmission to Susceptible Cassava plants. African Journal of Food, Agriculture, Nutrition and Development. 15 (4), 10335–10351. doi:10.4314/ajfand.v15i4.

Saefudin (2014) Tantangan dan Kesiapan Teknologi Penyediaan Bahan Tanam Mendukung Peningkatan Produktivitas Nasional Tanaman Lada (Piper nigrum L.). Perspektif. 13 (2), 111–125.

Sarma, Y.R., Kiranmai, G., Sreenivasulu, P., Anandaraj, M., Hema, M., Venkatramana, M., Murthy, A.K. & Reddy, D.V.R. (2001) Partial Characterization and Identification of A Virus Associated with Stunt Disease of Black Pepper (Piper nigrum) in South India. Current Science. 80 (3), 459–462.

de Silva, D., Jones, P. & Shaw, M. (2002) Identification and Transmission of Piper Yelow Mottle Virus and Cucumber Mosaic Virus Infecting Black Pepper (Piper nigrum) in Sri Lanka. Plant Pathology. 51, 537–545.

Sitepu, D. & Mustika, I. (2000) Disease of Black Pepper and Their Management in Indonesia.In: Ravindran,P.. (ed.) Black Pepper (Piper nigrum L.). Hardwood Academic Publisher, pp.297–308.

Sukamto (2014) Bibit Bermutu Lada : Awal Sukses Keberhasilan. Berita Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat. http://balittro.litbang.pertanian.go.id/ind/index.php/en/latest-news/ 270-bibit-bermutu-lada-awal-sukses-keberhasilan. [Diakses: 1 Februari 2016].

Wahyudi, A. & Wulandari, S. (2015) Pengembangan Sistem Pembibitan sebagai Basis Pengembangan Usaha Tani Lada di Bangka Barat. Dalam: Prosiding Seminar Perbenihan Tanaman Rempah dan Obat. pp.137–143.




DOI: http://dx.doi.org/10.21082/bullittro.v27n2.2016.155-162

Refbacks

  • There are currently no refbacks.




Copyright (c) 2017 Buletin Penelitian Tanaman Rempah dan Obat

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License.



View My Stats

Creative Commons License
Buletin Penelitian Tanaman Rempah dan Obat is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
Based on a work at http://ejurnal.litbang.pertanian.go.id/index.php/bultro

Buletin Penelitian Tanaman Rempah dan Obat (BUL LITTRO) Editorial Office :

Indonesian Spices and Medicinal Crops Research Institute (ISMCRI)
Jl. Tentara Pelajar No. 3 Bogor, Indonesia 16111
Telp. (0251) 8321879, Fax. (0251) 8327010
E mail : buletintro@gmail.com
Website : http://balittro.litbang.pertanian.go.id