DEHIDRASI DAN PEMBEKUAN JARINGAN APEKS TEBU UNTUK PENYIMPANAN JANGKA PANJANG

IKA ROOSTIKA, RARA PUSPITA DEWI LIMA WATI, DARDA EFENDI

Abstract


ABSTRAK
Tebu (Saccharum officinarum L.) merupakan tanaman yang
diperbanyak secara vegetatif. Kriopreservasi merupakan metode yang
paling sesuai untuk penyimpanan jangka panjang bagi tanaman yang
diperbanyak secara vegetatif. Dehidrasi dan pembekuan jaringan merupa-
kan tahapan paling kritis yang menentukan keberhasilan kriopreservasi.
Tujuan penelitian adalah untuk memperoleh durasi dehidrasi yang optimal
dan metode pembekuan jaringan apeks tebu. Penelitian dilakukan di
Laboratorium Kultur Jaringan, Kelompok Peneliti Biologi Sel dan
Jaringan, Balai Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumber-
daya Genetik Pertanian, Bogor pada Mei 2013 sampai Februari 2014.
Untuk optimasi metode dehidrasi, apeks direndam dalam larutan PVS2
(MS + gliserol 30% + etilen glikol 15% + dimetil sulfoksida 15% +
sukrosa 0,4 M) selama 10, 20, 30, dan 40 menit. Untuk optimasi metode
pembekuan, diujikan kombinasi perlakuan prakultur (dengan sukrosa 0;
0,1; dan 0,3 M selama 5 hari) dan pemuatan dalam larutan LS (MS +
gliserol 2 M + sukrosa 0,4 M) selama 0, 10, 20, dan 30 menit sebelum
tahapan dehidrasi dan pembekuan jaringan di dalam nitrogen cair (-
196 o C). Hasil penelitian menunjukkan durasi dehidrasi jaringan yang
terbaik adalah 30 menit dalam larutan PVS2. Kombinasi perlakuan
prakultur dengan sukrosa 0,3 M dan pemuatan dengan larutan LS selama
10 menit merupakan metode terbaik untuk pembekuan jaringan. Persentase
tumbuh sebelum dan setelah pembekuan dalam nitrogen cair berturut-turut
adalah 100 dan 40%. Setelah kriopreservasi, biakan mampu tumbuh
dengan tingkat multiplikasi tunas sekitar 10 tunas/eksplan. Metode yang
diperoleh pada penelitian ini berpeluang diterapkan untuk penyimpanan
plasma nutfah tebu dalam jangka panjang secara kriopreservasi dan
eliminasi patogen obligat secara krioterapi.
Kata kunci: Saccharum officinarum L., apeks, dehidrasi, pembekuan,
nitrogen cair

ABSTRACT
Sugarcane (Saccharum officinarum L.) is vegetatively propagated
plant. Cryopreservation is the most suitable method for long-term
preservation of vegetatively propagated plant. Dehydration and freezing
are critical steps of successful cryopreservation so that it should be
optimized. The research aimed to obtain the optimal duration of
dehydration and freezing method of sugarcane apex tissues. The
experiments were conducted at Tissue Culture Laboratory, Plant Cell
Tissue Biology Group, Indonesian Center for Agricultural Biotechnology
and  Genetic  Resources  Research  and  Development  on  May
2013−February 2014. To optimize dehydration method, the tissues were
exposured in PVS2 solution (MS + 30% glycerol + 15% ethylene glycol +
15% dimethyl sulphoxide + 0.4 M sucrose) for 10, 20, 30, and 40 minutes.
To optimize freezing method, the combined treatment of preculture with
sucrose (0, 0.1, dan 0.3 M) for 5 days and loading in LS solution (MS + 2
M glycerol + 0.4 M sucrose) for 0, 10, 20, dan 30 minutes) were tested
before dehydration for 30 minutes and freezing in liquid nitrogen (-196 o C).
The best duration of dehydration was 30 minutes. The combined treatment
of preculture on 0.3 M sucrose and loading for 10 minutes was the best
method for tissues freezing. Percentage of regrowth before and after
freezing in liquid nitrogen was 100 and 40% respectively. After
cryopreservation, the cultures could grow with high shoot multiplication
rate about 10 shoots/explant. The method resulted in this study can be
applied for long-term storage of sugarcane germplasms by cryopreser-
vation and (elimination of obligate pathogens by cryotherapy.
Keywords: Saccharum officinarum L., apex, dehydration, freezing, liquid
nitrogen.


Full Text:

PDF


DOI: http://dx.doi.org/10.21082/littri.v21n1.2015.25-32

Refbacks

  • There are currently no refbacks.




Copyright (c)


Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.



P-ISSN: 0853-8212
E-ISSN: 2528-6870

Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan
Jln. Tentara Pelajar No 1, Kampus Penelitian Cimanggu
Bogor 16111 Indonesia
Phone: +62251-8313083
Fax: +62251-8336194
Email: littri_puslitbangbun@yahoo.co.id



View My Stats