Development of GAL4/VP16 Facilitated-enhancer Trap System for Rice Crop Improvement

Sri Kurniati, Andrzej Kilian

Abstract


Pengembangan Sistem Perangkap Enhancer yang Difasilitasi
oleh Aktivator Transkripsi GAL4/VP16 untuk Perbaikan
Tanaman Padi. Sri Koerniati dan Andrzej Kilian.
Peningkatan produksi padi untuk memenuhi kebutuhan
nasional dilakukan melalui perbaikan tanaman, termasuk
pencarian dan isolasi gen-gen baru melalui mutasi. Aplikasi
berbagai sekuen mutagen, elemen loncat atau T-DNA, didukung
dengan teknik PCR merupakan perdekatan yang lebih
baik dibandingkan dengan metode klasik. Perangkap enhancer
adalah sistem yang dikembangkan untuk mengatasi
masalah rendahnya tingkat perolehan mutan, akibat banyak
gen berfungsi sama atau satu gen berfungsi pada beberapa
tingkat perkembangan tanaman. Sistem ini mampu menampilkan
ekspresi pada jaringan tertentu (spatial) dan atau
pada waktu tertentu (temporal) pada tanaman hemizigot
(hemizygous plants). Penelitian ini bertujuan untuk (1) mengembangkan
vector cassette perangkap enhancer dengan
komponen utama aktivator transkripsi GAL4/VP16 dan dua
gen reporter (gus dan gusPlus), dan (2) memperoleh informasi
tentang ekspresinya pada padi. Sepuluh vector diperoleh
dan ditransformasikan ke kalus padi Nipponbare dan
Millin dengan Agrobacterium tumefaciens. Kajian vektor
melalui ekspresi gen reporter diamati pada kalus 3 hari
setelah co-cultivation dan jaringan vegetatif dari 745 lini
penangkap enhancer. Sembilan puluh lima persen nomor
memiliki ekspresi dan persentase lebih tinggi daripada yang
telah dilaporkan sebelumnya. Lini dengan vektor GAL4/VP16
delesi tidak memiliki ekspresi pada kalus dan jaringan vegetatif,
walaupun hasil Southern Blot menunjukkan tanaman
ini memiliki dua T-DNA. Tiga puluh dua persen lini gusPlus
memiliki ekspresi yang kuat, sedangkan 30% berekspresi
lemah dibandingkan dengan masing-masing 12% dan 47%
untuk lini gus. Lini gusPlus juga tersebar pada lebih banyak
pola ekspresi. Jumlah insersi pada lini perangkap enhancer
berkisar antara 1-7 T-DNA dan 49% di antaranya memiliki
satu T-DNA. gusPlus merupakan gen reporter yang lebih
sensitif daripada gus dan GAL4/VP16 terbukti berfungsi.


Keywords


Sistem perangkap enhancer; gen reporter gus dan gusPlus; padi

Full Text:

PDF


DOI: http://dx.doi.org/10.21082/jbio.v5n1.2009.p16-24

Refbacks

  • There are currently no refbacks.




Copyright (c) 2016 Jurnal AgroBiogen

 Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.


            


P-ISSN : 1907-1094
E-ISSN : 2549-1547


Jurnal AgroBiogen

Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumber Daya Genetik Pertanian

Jl. Tentara Pelajar 3A, Bogor 16111
Jawa Barat, Indonesia
Telp.: (0251) 8339793, 8337975
Faks.: (0251) 8338820
E-mail: jurnal.agrobiogen@gmail.com
Situs: http://biogen.litbang.pertanian.go.id



View My Stats